熒光顯微鏡使用的重要注意事項(xiàng)
一、操作指南: (1)一般需要關(guān)掉實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的電燈,開(kāi)顯微鏡汞燈。需要延長(zhǎng)汞燈的使用壽命,就要汞燈開(kāi)啟不到請(qǐng)?jiān)?5-30分鐘后再關(guān)閉汞燈。 下一次打開(kāi)汞燈電源的距離這次關(guān)閉相隔時(shí)間應(yīng)該30分鐘以上,較好要禁止反復(fù)開(kāi)關(guān)。 (2)根據(jù)樣品熒光素來(lái)挑選適合的熒光組件。利用減光片對(duì)熒光強(qiáng)度靈活進(jìn)行調(diào)整(熒光強(qiáng)度是不可調(diào), 需要利用各種減光片來(lái)實(shí)時(shí)的調(diào)整觀測(cè)效果) (3)不同的激發(fā)光波長(zhǎng)應(yīng)該選擇不同的濾光片,常有綠、藍(lán)、紫、紫外等 (4)放置染色切片,調(diào)整好合適視野,可以先在明場(chǎng)下調(diào)校要觀察的位置再使用熒光。一般熒光狀態(tài)觀測(cè)標(biāo)本, 標(biāo)本熒光會(huì)很快的的衰減,所以避免較長(zhǎng)時(shí)間的熒光下觀測(cè), (5)在實(shí)驗(yàn)前確認(rèn)好是否需要拍片,并且確認(rèn)照相機(jī)實(shí)驗(yàn)前已裝好節(jié)省時(shí)間。 (6)使用熒光顯微鏡結(jié)束后,關(guān)掉所有電源,而且需做好使用記錄。
二、主要事項(xiàng):
(1)嚴(yán)格遵循熒光顯微鏡使用說(shuō)明書(shū)要求使用,禁止隨意改變使用步驟。 (2)應(yīng)該在暗室中操作。在暗室內(nèi),等待眼睛完全適應(yīng)暗室, 再開(kāi)始觀察標(biāo)本。,開(kāi)啟電源,啟動(dòng)高壓汞燈5~15分鐘 (3)為避免紫外線對(duì)眼睛損害。再調(diào)校光源同時(shí)佩戴防護(hù)眼鏡。 (4)觀測(cè)時(shí)間每次以1~2小時(shí)較佳,超過(guò)100分鐘,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也會(huì)明顯衰退或褪色; 激發(fā)光長(zhǎng)時(shí)間的照射,會(huì)發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象; (5)熒光顯微鏡的汞燈使用時(shí)間有限,實(shí)驗(yàn)標(biāo)本較好集中檢測(cè),延長(zhǎng)光源使用時(shí)間。溫度高時(shí),應(yīng)配備降溫系統(tǒng), 新?lián)Q燈泡要進(jìn)行記錄使用記錄。 (6)觀測(cè)立刻觀測(cè)在標(biāo)本染色后,熒光會(huì)隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸減弱。但是將標(biāo)本放置于聚乙烯塑料袋中4℃保存, 可延長(zhǎng)熒光減弱速度 (7)熒光亮度標(biāo)準(zhǔn):為四級(jí),即“—”——無(wú)或可見(jiàn)微弱自發(fā)熒光。“+”——僅能見(jiàn)明確可見(jiàn)的熒光。“++”——可見(jiàn)有明亮的熒光。“+++”——可見(jiàn)耀眼的熒光。 (8)使用玻片等載體,厚度必須均勻,沒(méi)有明顯自發(fā)熒光,如使用油鏡,保證鏡油必須是無(wú)熒光鏡油。 (9)裝穩(wěn)壓器,電壓的不穩(wěn)定將降低汞燈的的使用時(shí)間,并影響鏡檢結(jié)果。
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